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Microscopie

LE MICROSCOPE -- Mode d'emplois

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ATTENTION !!! CERTAINS PRODUITS CITES SONT DANGEREUX ET PEUVENT ETRE  CORROSIFS, TOXIQUES, NOCIFS...

   RÉSUMÉ

COMMENT FAIRE DES PRÉPARATIONS

La fixation

La fixation consiste à tuer les cellules et à les conserver dans l'état le plus rapproché de ce qu'elles étaient pendant la vie. Pour pouvoir conserver vos préparations, nous insistons sur la nécessité du fixage. Le picroformol de Bouin est considéré comme un fixateur universel. Il peut convenir pour toutes sortes de travaux et conservera les détails histologiques essentiels.

• Exécution.
  1. Faire glisser au fond d'un tube de verre ou déposer dans un verre de montre, l'objet. Recouvrir de fixateur [petits objets, action rapide).
  2. Laver.

Lavage 

Le lavage, après fixation, ne doit pas être négligé. Sans cela, la conservation et la coloration des objets seraient compromises. Cette opération importante doit suivre immédiatement la fixation.

• Exécution.
  1. Remplir d'eau votre tube de verre ou votre verre de montre.
  2. Renouveler l'eau plusieurs fois de façon à ce qu'il ne reste plus trace de fixateur.

Transparence

Pour les objets opaques, il est nécessaire d'employer des produits éclaircissants: potasse à 20 % (éclaircissant pour gros insectes).

• Exécution.
  1. Dans un tube de verre, faire glisser l'objet. Recouvrir de potasse (temps très variable suivant l'objet). On peut opérer à chaud: l'opération ne demanderait que quelques minutes. Mais ce procédé n'est pas conseillé; destruction de certains détails et projection possible de la potasse à l'ébullition.
  2. Verser le tout dans un verre de montre. Laver abondamment. Puis, presser légèrement avec les doigts ou un tube de verre pour faire sortir les matières dissoutes.
  3. Laver abondamment avec de l'eau acétifiée à 5 %.
  4. Laver à l'eau ordinaire.

Lactophénol.

Le lactophénol sera conseillé pour tissus végétaux et petits animaux.

Chloral-lactophénol.

Le chloral-lactophénol sera conseillé pour insectes ou parties d'insectes. Eclaircissant plus puissant que le lactophénol.

Chioral-phénol.

Recommandé pour les insectes, éclaircit et déshydrate, ne pas colorer.

• Exécution.
  1. Recouvrir l'objet de lactophénol ou de chloral-lactophénol. Laisser l'objet quelquefois plusieurs jours, jusqu'à ce que l'éclaircissement soit suffisant. (On peut accélérer l'opération en chauffant légèrement et en renouvelant le produit trois ou quatre fois.) Cette opération étant beaucoup plus rapide, examiner après une heure de traitement. Arrêter dès que l'objet est suffisamment éclairci.
  2. Laver.

Hypochlorite.

Eclaircissement pour la botanique, bois, racine, feuilles, etc. Pour éclaircir les membranes cellulosiques et les coupes d'anatomie végétale.

• Exécution.
  1. Placer l'objet dans un verre de montre. Recouvrir d'hypochlorite de quelques secondes à dix minutes, jusqu'à blanchissement.
  2. Laver abondamment à l'eau acétifiée à 5 %.
  3. Laver à l'eau.

Coloration.

Les détails de l'objet à l'état frais sont insuffisants. Cela est dû au manque de transparence et à l'indice de réfraction qui est à peu près le même pour les différents milieux. Il faut donc colorer pour suppléer aux différences d'indices par les différences de coloration.
La faible réfringence des microorganiques et les grossissements considérables nécessaires à leur observation exigent avant tout l'examen des artifices de préparations.
Les colorations jouent un très grand rôle dans la microscopie. quelques essais permettront, suivant leur nature, de se rendre compte de la durée de la coloration.

• Exécution. Coloration de la matière végétale.
  1. Carmin aluné: 20 minutes ou plus.
  2. Laver.
  3. Laisser dans le verre de montre quelques gouttes d'eau. Ajouter très peu de solution de vert d'iode. Laisser quelques minutes.
  4. Laver.

Coloration pour organismes animaux ou végétaux.

• 1. Colorer à l'hémalun: 10 à 20 minutes.
  2. Laver.
  3. Colorer dans un mélange (éosine orangé G. en parties égaies). 5 minutes ou plus.
  4. Laver.

Déshydratation.

On ne peut monter dans le baume que les objets dans lequel toute trace d'eau aura disparu. Sans cela, l'objet produirait des louches qui le rendrait inutilisable.
Méthode de déshydratation courante:
On mettra l'objet dans l'alcool à brûler pendant une demi-heure. On changera l'alcool deux fois. Transférer dans l'alcool absolu pendant une demi-heure, changer l'alcool trois fois.
Vider et recouvrir de xylol, une première fois 5 minutes, vider et recouvrir à nouveau de xylol; si la déshydratation est bonne, le xylol reste limpide.

SÉCHAGE DES PRÉPARATIONS

1. Pour la gélatine glycérinée, il suffit de laisser refroidir la préparation à plat. La gélatine se solidifie rapidement; ne pas oublier de luter. Pour la coumarone et pour les objets ne craignant pas la chaleur, sable, diatomée, etc.
2. Passer la préparation sur la flamme de la lampe à alcool, bien horizontalement dans un mouvement de va-et-vient jusqu'à ce que la coumarone entre en ébullition quelque secondes; laisser refroidir à plat.
3. Pour le Baume du Canada (en hiver), placer la préparation à plat sur la plaque de protection d'un radiateur. En été, mettre la préparation dans une boîte en carton, toujours à plat, la boîte fermée; laisser exposer au grand soleil pendant plusieurs jours.

PRÉPARATIONS TEMPORAIRES

1. Dans un récipient rempli d'eau (l'eau de pluie convient parfaitement), laisser séjourner plusieurs jours soit une poignée de cresson ou une poignée de foin. L'eau brunit et sent mauvais; il se forme un voile à la surface.

2. Prélever avec le doigt une portion de ce voile, la déposer au milieu d'un porte-objet; examiner; le résultat serait meilleur si vous complétez par ce qui suit :

3. Vous avez préparé à l'avance du rouge neutre au 1/3000 o, coloration vitale peu toxique. Dans le commerce, vous trouverez généralement du rouge neutre à 1%, Cela est beaucoup trop élevé. Vous le modifier ainsi:: verser dans un verre de montre 29 gouttes d'eau, ajouter une goutte de rouge neutre, agiter puis déposer délicatement une goutte sur votre voile; éponger l'eau en excédent, recouvrir d'un couvre-objet (il faut éviter que la goutte d'eau déborde le couvre-objet, sans cela une grande partie des organismes serait chassée).

4. Examiner: vous verrez un monde en mouvement, représenté par des espèces unicellulaires, expression la plus simple de la vie animale. La cellule unique remplit toutes les fonctions vitales. Les infusoires nagent à l'aide de cils, les flagellés à l'aide de fouet, les amides rampent. C'est un exercice très intéressant et instructif.

Observations n'offrant aucune difficulté.

Observations n'offrant aucune difficulté

Ces préparations ne peuvent pas être conservées. Les examens peuvent se faire sur une multitude d'objets: ailes d'insectes, d'oiseaux, sable, pollen, étamines, ailes de papillons, pattes d'insectes, écailles de poissons etc.

Exemple: écaille de poisson:

• Prendre une écaille de poisson qui a été bien lavée au savon.
• Colorer à la safranine.
• Laver à l'eau du robinet.
• Eponger avec un buvard.
• Porter l'écaille au milieu d'un porte-objet.
• Faire tomber une goutte de liquide glycériné sur l'écaille.
• Couvrir avec un couvre-objet.

Examiner.

Nous insistons sur la quantité innombrable d'objets à examiner de cette façon.

PRÉPARATIONS DÉFINITIVES

Pour s'habituer à faire des préparations, nous conseillons l'exercice sur des objets faciles à monter. Par la suite, ayant acquis de l'habileté, il vous sera facile d'exécuter des préparations plus compliquées.
Voici une série de préparations n'offrant pas de difficultés particulières et dont la réussite n'est qu'une question de soin et de patience. Ne pas oublier d'utiliser le baume du Canada, la coumarone et la gélatine glycérinée, comme indiqué plus haut.

CRISTAUX - PERMANGANATE DE POTASSE

Faire dissoudre 2 grammes de permanganate de potasse dans 10 cm' d'eau distillée, agiter la bouteille.

Avec un compte-gouttes prélever un peu de liquide, faire tomber au centre d'un porte-objet une goutte de permanganate, vider le compte-gouttes, avec le bout du compte-gouttes étendre la goutte de façon à ce qu'elle ait un diamètre de 15 à 16 mm; laisser sécher à l'abri de la poussière.

Lorsqu'il n'y a plus aucune trace d'humidité, faire tomber sur le permanganate une goutte de baume, couvrir avec un couvre-objet.

Laisser sécher.

Montage à la coumarone.
Même principe.
Montage à la gélatine glycérlnée.
Même principe qu'avec le baume.

Luter.

Pour les cristaux susceptibles de se dissoudre dans le baume, monter en cellule, ou à la gélatine glycérinée.

AILE DE MOUCHE

Montage au baume du Canada.

Montage au baume du Canada.

Détacher l'aile du corps avec de petits ciseaux, couper la partie qui adhère au corps de façon à ce que l'aile ait une épaisseur régulière.

• Laver à l'eau du robinet.
• Passer à l'alcool à brûler rapidement.
• Laisser sécher.
• Sur un porte-objet déposer au centre une toute petite goutte de baume.
• Avec la pince, saisir l'aile, la tremper dans le xylol et la déposer sur le baume, laisser évaporer quelques minutes.
• Faire tomber sur l'aile deux gouttes de baume, couvrir avec un couvre-objet, si le baume est assez fluide, il s'étendra doucement sur toute la surface.
• Laisser sécher à plat.
• Le montage à la coumarone se fera de la même façon, mais nous vous recommandons le montage au baume.

Montage à la gélatine glycérinée

1, 2, 3, 4, comme ci-dessus.

• 5. Passer l'aile dans le liquide glycériné, laisser évaporer au moins une heure.
• Sur un porte-objet que vous avez légèrement chauffé, faire tomber au centre une goutte
• de gélatine glycérinée.
• Déposer l'aile au milieu de la goutte, faire tomber une deuxième goutte sur l'aile, couvrir
• avec un couvre- objet. Si l'opération n'a pas été assez rapide et que la gélatine s'est
• solidifiée, chauffer légèrement sur la flamme de la lampe à alcool, laisser refroidir la
• préparation à plat.
• 8. Luter.

Faire fondre la gélatine glycérinée au bain-marie, aussitôt fondue, retirer de l'eau.
Les ailes d'abeilles de guêpes, etc., se montent de la même façon

ECAILLE DE SOLE

Montage au baume

• Rassembler dans le creux de la main quelques écailles avec une brosse à dents imprégnée de savon, frotter et laver sous le robinet.
• Une fois bien lavées, mettre les écailles dans un tube à essais, recouvrir de bleu de méthylène phéniqué, laisser un quart d'heure.
• Laver sous le robinet; vous pouvez vous servir du petit verre en matière plastique.
• Saisir les écailles à la pince, les mettre dans un verre de montre, recouvrir d'alcool à brûler.
• Choisir les plus belles et les placer sur un porte- objet, recouvrir par un deuxième porte-objet, fixer les deux porte-objets au moyen de deux pinces à linge à chaque extrémité inonder d'alcool à brûler puis laisser pendant 24 heures. Les écailles seront aplaties.
• Sur un porte-objet déposer au centre une toute petite goutte de baume.
• Dans un verre de montre, mettre un peu de xylol.
• Retirer les pinces à linge, enlever le porte-objet du dessus, saisir avec une pince une écaille, la tremper dans le xylol et la déposer sur la goutte de baume, laisser évaporer quelques minutes.
• Faire tomber deux gouttes de baume sur l'écaille, couvrir avec un couvre-objet.
• Laisser sécher à plat.

Montage à la gélatine glycérinée

1, 2, 3, 4, 5 comme ci-dessus.

• 6. Passer l'écaille dans le liquide glycériné, laisser évaporer.
• 7. Sur un porte-objet que vous avez légèrement chauffé, faire tomber au centre une goutte de gélatine glycérinée.
• 8. Déposer l'écaille au milieu de la goutte, faire tomber une deuxième goutte sur l'écaille, couvrir avec un couvre-objet. Laisser refroidir la préparation à plat.
• Luter. Les écailles de goujons, de bars, etc., se montent de la même façon

AIGRETTE D'IMMORTELLE

Montage au baume du Canada

• Prendre une fleur d'immortelle bien épanouie, retirer les pétales.
• Recouvrir de lactophénol, laisser 48 heures ou plus.
• Laver à l'eau du robinet.
• Colorer au violet de gentiane, laisser une heure.
• Laver à l'eau du robinet.
• Passer à l'alcool à brûler trois fois et environ 10 minutes chaque fois.
• Laisser sécher à l'air libre.
• Dans un verre de montre, mettre quelques gouttes de xylol.
• Sur un porte-objet, déposer au centre une goutte de baume.
• Avec la pince, saisir une aigrette, la porter dans le xylol et la déposer sur la goutte de baume, laisser évaporer quelques minutes.
• Faire tomber 3 ou 4 gouttes de baume sur l'aigrette, couvrir avec un porte-objet.
• Laisser sécher à plat.

POLLEN, ROSE TREMIERE, LYS, etc.

Montage au baume du Canada

Détacher avec la pince les étamines de quelques roses trémières, les mettre dans un tube de verre, recouvrir de picroformol, agiter, laisser reposer, retirer à la pince les plus grosses parties.

• Laver à l'eau du robinet.
• Recouvrir de bleu de méthylène phéniqué 15 minutes.
• Laver à l'eau du robinet.
• Recouvrir rapidement d'alcool faible, puis d'alcool à brûler.
• Laisser sécher.
• Avec l'aiguille lancéolée, déposer au milieu d'un porte-objet une petite pincée de pollen, éparpillez-la légèrement.
• Faire tomber doucement sur le pollen une goutte de xylol, laisser évaporer.
• Avant qu'il ne soit complètement évaporé, faire tomber sur le pollen 2 ou 3 gouttes de baume, recouvrir avec un couvre-objet.
• Laisser sécher.

Montage à la gélatine glycérinée

• 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, même opération que ci-dessus.
• 8. Faire tomber une goutte de liquide glycériné sur le pollen, éponger avec un buvard en excédent, laisser évaporer une heure ou deux à l'abri de la poussière.
• 9. Faire tomber 2 ou 3 gouttes de gélatine sur le pollen, recouvrir avec un couvre-objet.
• 10. Laisser refroidir.
• Luter.

DIATOMÉES - SPONGIAIRES - GORGONES SABLE IMPALPABLE- RADIOLAIRE, etc.

Montage à la coumarone.

• Dans un tube de verre, verser un peu de xyloi, ajouter de la poudre de diatomées jusqu'à ce que le xylol prenne une teinte laiteuse.
• Avec un compte-gouttes que on remplit et vide plusieurs fois, pour que les diatomées nagent bien dans le xylol, faire tomber une goutte sur un porte-objet; laisser presque complètement sécher.
• Faire tomber 2 gouttes de coumarone sur les diatomées, recouvrir avec un couvre-objet.
• Avec une pince à linge (pour éviter de se brûler), fixer entre les deux mâchoires de la pince votre préparation; avoir soin de tenir la préparation bien horizontale.
• Allumer votre lampe à alcool, dans un mouvement de va-et-vient, passer la préparation dans la flamme, le couvre-objet en dessus jusqu'à ce que le coumarone entre en ébullition en quelques secondes; laisser refroidir.

Note: Ce procédé n'étant employé que pour les objets qui ne risquent pas de changer de structure à la chaleur.

Montage à la gélatine glycérinée.

• 1 et 2 comme ci-dessus, mais laisser complètement évaporer le xylol.
• 3. Recouvrir d'une goutte de gélatine glycérinée, éponger avec un buvard, laisser évaporer.
• 4. Faire tomber sur les diatomées 2 gouttes de gélatine, recouvrir avec un couvre-objet.
• 5. Laisser refroidir.
• 6. Luter.

CHAMPIGNONS

Montage à la gélatine
Les moisissures sont faciles à obtenir. Prenez une tranche de pain imprégnée d'eau que vous déposerez dans une assiette; recouvrir avec une cloche de verre. Au bout de quelques jours les champignons seront formés.

• Avec votre aiguille lancéolée, prélever des fragments de moisissure; déposer sur un porte-objet.
• Recouvrir de 2 gouttes d'alcool absolu, laisser évaporer, les moisissures adhéreront au verre.
• Recouvrir de 2 gouttes de bleu lactique, éponger l'excédent du produit avec un buvard.
• Monter directement dans la gélatine glycérinée.
• Luter.

POILS DE TAUPE, DE SOURIS, etc.

Montage au baume

Dans un tube de verre, recouvrir une touffe de poils de chioral-phénol; faire chauffer sur la flamme de la lampe à alcool, changer le chioral-phénol trois fois. Les trois opérations demanderont quelques minutes.

• Vider le chioral-phénol, recouvrir de xylol.
• Porter les poils sur le porte-objet.
• Faire tomber sur les poils 2 gouttes de baume, recouvrir avec un couvre-objet.
• Laisser sécher.
• Montage à la gélatine glycérinée.
• Comme ci-dessus.
• Laver à l'eau du robinet.
• Recouvrir de liquide glycériné.
• Porter les poils sur un porte-objet, laisser évaporer.
• Faire tomber 2 gouttes de gélatine glycérinée sur les poils, chauffer légèrement la préparation sur la flamme de la lampe à alcool, laisser refroidir.
• Luter.

CRUSTACÉS, DAPHNIES, etc.

Montage au baume.

• Fixer au picroformol de Bouin 30 minutes.
• Laver à l'eau du robinet.
• Colorer à l'éosine 15 minutes.
• Passer à l'alcool faible, puis à 90 °, 10 minutes.
• Passer à l'alcool absolu, deux fois 10 minutes.
• Recouvrir de xylol.
• Porter avec le pinceau ou avec un compte-gouttes les crustacés sur un porte-objet.
• Faire tomber 2 ou 3 gouttes de baume sur les crustacés.
• Placer le couvre-objet.
• Laisser sécher.

Montage à la gélatine glycérinée.

1, 2, 3 comme ci-dessus.

• 4. Passer au liquide glycériné
  5. Porter avec le pinceau les crustacés sur un porte-objet, laisser évaporer.
  6. Faire tomber sur les crustacés 2 ou 3 gouttes de gélatine glycérinée.
  7. Recouvrir avec un couvre-objet.
  8. Laisser refroidir.
  9. Luter.

VERS DE VASE

• Montage au baume du Canada.
• Mettre quelques vers de vase dans un tube de verre, recouvrir avec du picroformol de Bouin, 1 heure.
• Laver à l'eau du robinet rapidement en vidant et remplissant le tube plusieurs fois.
• Recouvrir par la potasse à 10 %, laisser 2 heures.
• Laver avec de l'acide acétique à 5 %.
• Laver à l'eau du robinet.
• Mettre dans le chloral-lactophénol jusqu'à bon éclaircissement.
• Laver à l'eau du robinet.
• Coloration à la safranine, laisser 1 heure.
• Laver à l'eau du robinet.
• Passer à l'alcool à 45 °, 5 min. deux fois; puis à l'alcool à brûler à 90 °, 5 min. deux fois.
• Deux bains d'alcool absolu, 20 minutes.
• Vider et recouvrir de xylol.
• Sur un porte-objet, mettre une toute petite goutte de baume.
• Avec le pinceau, saisir un ver de vase et le porter sur la goutte de baume; laisser évaporer quelques minutes.
• Faire tomber 2 ou 3 gouttes de baume sur le ver, recouvrir avec le couvre-objet; appuyer, si nécessaire, très légèrement sur le couvre-objet.
• Laisser sécher à plat.

Montage à la gélatine glycérinée
1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 comme ci-dessus.

• 10. Passer au liquide glycériné.
• 11. Sur un porte-objet, déposer une goutte de gélatine glycérinée
• 12. Porter avec le pinceau le ver au milieu de la goutte, ajouter une nouvelle goutte de gélatine,
• couvrir avec le couvre-objet. Si la gélatine ne couvre pas en entier le couvre-objet, passer rapidement sur la flamme de la lampe à alcool.
• 13. Laisser sécher à plat.
• 14. Luter.

Note: Faire attention de ne pas trop chauffer la gélatine, sans cela le ver de vase serait cuit et ne ressemblerait plus à rien.

CONFECTION DE FROTTIS DE SANG

• Prendre un porte-objet, le tremper dans l'alcool chlorhydrique à 10 %, bien l'essuyer avec un chiffon ne peluchant pas; faire la même opération avec le couvre-objet. Opérez rapidement pour les 2', 3' et 4' fois pour éviter que le sang ne se coagule.
• Faire flamber une épingle et se piquer le doigt au-dessous de l'ongle.
• Déposer sur la droite du porte-objet une goutte de sang grosse comme une tête d'épingle.
• Faire entrer en contact avec un couvre-objet le sang du côté gauche de la goutte; le sang va filer le long de la tranche du couvre-objet.
• Pousser le couvre-objet sur votre gauche, ce dernier entraînera le sang. Le sang doit être entraîné mais non poussé, c'est pourquoi il faut placer le couvre-objet sur le côté gauche de la goutte.
• Agiter rapidement le porte-objet de façon à ce que le sang sèche à l'air.
• Fixer avec une goutte d'alcool absolu, laisser sécher.
• Colorer au bleu de méthylène.
• Laver à l'eau distillée.
• Faire tomber sur le sang une goutte d'alcool absolu par un mouvement brusque du porte-objet, rejeter le maximum de liquide, laisser sécher.
• Une goutte de baume, couvrir avec un couvre-objet, laisser sécher

FEUILLES

• Montage au baume.
• Couper en petits carrés.
• Recouvrir de picroformol de Bouin, 1 heure ou plus.
• Laver à l'eau du robinet.
• Recouvrir de chloral-lactophénol, chauffer légèrement, laisser refroidir; vider, recommencer la même opération trois fois en 2 heures. Vérifier si la feuille est assez éclaircie.
• Laver à l'eau du robinet.
• Recouvrir de vert d'iode, 15 minutes.
• Laver à l'eau distillée.
• Recouvrir d'alcool à brûler 10 minutes, deux fois.
• Recouvrir d'alcool absolu, 10 minutes deux fois, vider.
• Recouvrir de xylol.
• Monter au baume.

Montage à la gélatine glycérinée.

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 comme ci-dessus.

• 8. Recouvrir de liquide glycériné.
• 9. Monter à la gélatine glycérinée.
• Luter.

PATTES DE MOUCHES

Avec le chloral-lactophénol.

• Faire mourir l'insecte dans l'alcool à brûler.
• Sectionner les pattes, les faire glisser dans un tube à essais, recouvrir de picroformol, laisser 2 ou 3 jours.
• Laver à l'eau du robinet.
• Remettre dans le tube et recouvrir de potasse à 10 %. Passer à la flamme cinq ou six fois en l'espace d'une heure; recommencer cette opération trois fois en changeant la potasse.
• Laver à l'eau du robinet, puis avec de l'eau acétifiée à 5 %.
• Recouvrir de chloral-lactophénol, passer à la flamme; changer le produit trois fois en l'espace de 48 heures; vérifier l'éclaircissement définitif au microscope.
• Laver à l'eau du robinet.
• Colorer à la safranine pendant une heure.
• Laver à l'eau du robinet.
• Passer à l'alcool à 60 °, puis à 90 °, et deux fois dans l'alcool absolu, vider.
• Recouvrir de xylol. Si le xylol reste limpide, la déshydratation est bonne; s'il y a des louches, replonger les pattes dans l'alcool absolu, vider et recouvrir à nouveau de xylol.
• Préparer un porte-objet avec une petite goutte de baume au centre.
• Avec la pince, saisir une patte et la porter, bien enduite de xylol, au milieu de la goutte de baume.
• Attendre quelques minutes pour que le xylol soit presque évaporé, à ce moment recouvrir la patte avec trois gouttes de baume, placer dessus le couvre-objet.
• Laisser sécher.

Avec le chioral-phénol.

Ne pas colorer. 1, 2, 3 comme ci-dessus.

• 4. Remettre dans le tube et recouvrir de chloral-phénol. Passer à la flamme une dizaine de fois
• Dans l'espace de deux heures. Recommencer cette opération trois fois; vérifier l'éclaircissement au microscope.
• 5. Avec la pince, saisir la patte et la porter au milieu d'un porte-objet, éponger avec un buvard le chloral-phénol en excédent.
• 6. Recouvrir par 3 gouttes de baume; mettre le couvre-objet en place.
• 7. Laisser sécher.

Montage à la gélatine glycérinée.

Montage à la gélatine glycérinée.

1, 2, 3, 4, 5 comme pour le montage au chloral-lactophénol.

• 6. Colorer à la safranine pendant une heure: si la coloration est trop forte, régresser dans
• l'alcool.
• 7. Laver à l'eau du robinet.
• 8. Mettre dans le liquide glycériné
• Avec la pince saisir la patte et la porter au milieu d'un porte-objet, éponger avec un buvard le liquide glycériné en excédent.
• 10. Recouvrir par 3 gouttes de gélatine glycérinée. mettre le couvre-objet en place.
• 11. Laisser refroidir.

En principe, les préparations courantes, à monter dans le baume du Canada, subissent les traitements suivants pour la botanique:

Fixation au picroformol de Bouin.

• Lavage à l'eau du robinet.
• Hypochlorite de soude pour vider les cellules.
• Lavage avec acide acétique à 5 % pour éliminer i'hypochlorite.
• Pour éclaircir: lactophénol ou chloral-lactophénol.
• Laver à l'eau du robinet.
• Colorer, si trop coloré, régresser soit dans l'alcool, soit à l'alcool chlorhydrique à 1%, soit à l'eau acétifiée à 1%, selon le cas.
• Laver à l'eau distillée, comme indiqué page 11.
• Alcool faible, puis alcool à brûler à 90 °.
• Pour terminer la déshydratation, alcool absolu.
• Xylol, doit rester limpide si la déshydratation est bonne.
• Baume du Canada, l'objet se conserve indéfiniment.

Pour monter dans la coumarone, même principe. L'indice de réfraction de la coumarone est plus élevé que celui du baume. Surtout recommandée pour monter les diatomées, radiolaires, sable, spongiaires, etc.

Montage à la gélatine glycérinée.

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, comme ci-dessus.

• 9. Passer au liquide glycériné.
• 10. Monter à la gélatine glycérinée.
• 11. Luter.

Note: Après le lactophénol, on pourra monter directement dans la gélatine glycérinée.
Pour les insectes et parties d'insectes, sauf pour les ailes sèches'

Picroformol.

• Lavage.
• Potasse à l'alcool (si on veut activer l'eclaircissement, chauffer sur la lampe à alcool, mais au lieu de mettre de l'alcool pour dissoudre la potasse, mettre de l'eau).
• Laver avec de l'acide acétique à 5 %.
• Lactophénol, chloral-lactophénol ou chioral-phénol terminer l'éclaircissement; vérifier au microscope.
• Laver à l'eau du robinet. Colorer. Laver à l'eau distillée.
• Alcool faible, puis alcool à brûler à 90 °
• Alcool absolu.
• Xylol.
• Baume.

Montage à la gélatine glycérinée.

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, comme ci-dessus.

• 9. Passer au liquide glycériné.
• 10. Monter dans la gélatine glycérinée.
• 11. Luter.